生物化学蛋白质沉淀实验报告（生物化学蛋白质沉淀实验报告思考题）

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求沉淀的蛋白质在饱和硫酸铜溶液中再溶解的解释

不可能吧！硫酸铜是重金属盐，会使蛋白质变性（即使蛋白质凝结），蛋白质变性后，不仅丧失了原有的可溶性，同时也失去了生理活性，所以不可能又溶解。

少量Cu2+使鸡蛋清中的蛋白发生变性而沉淀；过量Cu2+可能会与蛋白中的某些基团（如氨基、羧基、肽键中的氮原子等）发生复杂的化学反应，从而使蛋白溶解。

不对，蛋白质溶液遇硫酸铜产生的沉淀，Cu2+是重金属，蛋白质会变性失活，那么肽链空间结构（如二硫键）被破坏，无法继续溶解。

生物碱沉淀反应是什么?

1、生物碱沉淀的反应一般在稀酸水溶液中进行。（2）净化处理 共存的蛋白质、多肽、鞣质等成分，这些物质也能与生物碱沉淀试剂发生沉淀的反应。

2、“现象是蛋白质溶液内加入生物碱试剂，产生絮状沉淀（大概植物体内具有显著生理作用的含氮碱性化合物成为生物碱。 能沉淀生物碱或与其产生颜色反应的物质称为生物碱试剂。

3、生物碱的沉淀反应的条件是酸性水溶液。生物碱沉淀反应的条件是要求在酸性水溶液中进行反应，生物碱沉淀反应一般在酸性水或稀醇中进行，沉淀试剂若在碱性条件下则试剂本身将产生沉淀，所以应在酸性水溶液中进行。

4、酸性水溶液。生物碱是碱性物质，而在酸性环境下，生物碱会与酸反应生成沉淀物，酸性条件下，酸中的氢离子（H+）与生物碱中的碱性部分发生中和反应，形成水和盐，并释放出气体或生成沉淀。

“变性的蛋白质易于沉淀,但沉淀的蛋白质不一定变性。”这句话能解释下...

1、【答案】：例如，血浆含有很多蛋白质，若加热、振荡或加入变性剂而变性，其中的酶失去活性，免疫球蛋白失去抗体作用，因为它们的空间结构已经改变了，虽然它们的一级结构未变，此时溶解度已降低，可轻易沉淀下来。

2、蛋白质变性是指光照，热，有机溶济以及一些变性剂（如重金属盐）的作用时蛋白质的空间结构被破坏，使得蛋白质丧失活性，该过程不可逆。沉淀可以是由蛋白质变性从而产生沉淀，也可以是由于盐析。

3、蛋白变性不一定就沉淀。只是空间结构的改变，基本的一级结构没有被破坏，一定条件下可以复性。只不过绝大多数条件都相当苛刻。蛋白沉淀不一定是蛋白质变性。

4、蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象，变性蛋白质一般易于沉淀，但也可不变性而使蛋白质沉淀，在一定条件下，变性的蛋白质也可不发生沉淀。蛋白质所形成的亲水胶体颗粒具有两种稳定因素，即颗粒表面的水化层和电荷。

5、举例来说，当加入低强度盐时，破坏了蛋白质外水化膜，使得蛋白质沉淀，但蛋白质构象不变，因此是非变性的。变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响，改变其分子内部结构和性质的作用。

生物化学测定蛋白质浓度的讨论与分析

双缩脲法测定蛋白质含量的干扰因素有三羟甲基氨基甲烷、一些氨基酸和EDTA。双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。

蛋白质浓度测定方法：UV法，BCA法，考马斯亮蓝法等。UV法。这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。选择Warburg 公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。

比色法尺度法 比色法是测定蛋白质含量最常用的方法之一。原理是利用蛋白质与染色剂反应生成复合物，进而通过比色反应来测定蛋白质浓度。

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